Shotgun蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定

蛋白質(zhì)全譜分析也可稱(chēng)為質(zhì)譜shotgun分析，指的是組分分析，研究對象是完整的組織、體液或其提

取物，其目的在于鑒定出盡可能多的肽和蛋白質(zhì)分子。

技術(shù)原理：

蛋白質(zhì)膠條/混合溶液鑒定

利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術(shù)對膠條樣本（即SDS-PAGE樣本）、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液

等中等復雜樣本進(jìn)行蛋白鑒定。

技術(shù)原理：

電噴霧（ESI）技術(shù)是將待測分子溶解在溶劑中通過(guò) HPLC 分離，以液相方式通過(guò)毛細管達到噴霧口，在噴霧口高壓電場(chǎng)作用下形成帶電荷的微滴，隨著(zhù)微滴中的揮發(fā)性溶劑蒸發(fā)，微滴表面的電荷體密度隨半徑減少而增加，達到某一臨界點(diǎn)時(shí)，樣品以離子化的方式從液滴表面蒸發(fā)，進(jìn)入質(zhì)量分析器。

蛋白質(zhì)膠點(diǎn)鑒定

利用MALDI-TOF/TOF蛋白鑒定技術(shù)對考/銀染的2D或DIGE膠點(diǎn)樣本或者較純的蛋白樣本進(jìn)行蛋白鑒定。

技術(shù)原理：

MALDI-TOF/TOF（基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜）儀器主要由兩部分組成：基質(zhì)輔助激光解析電離離子源（MALDI）和飛行時(shí)間質(zhì)量分析器（TOF）?；|(zhì)輔助激光解析（MALDI）技術(shù)是將樣品均勻包埋在基質(zhì)中，基質(zhì)吸收激光提供的能量而蒸發(fā)，攜帶部分樣品分子進(jìn)入氣相，并將一部分能量傳遞給樣品分子使其離子化。TOF 的原理是離子在電場(chǎng)作用下加速飛過(guò)飛行管道，根據到達檢測器的飛行時(shí)間不同而被檢測，即測定離子的質(zhì)荷比（M/Z）與離子的飛行時(shí)間成正比，從而檢測離子。